Un espectrofotómetro es un instrumento ampliamente utilizado en los laboratorios para medir la absorbancia de una muestra, en función de la longitud de onda de una radiación electromagnética, y de esta manera conocer la concentración de las sustancias en una solución.

La importancia de un espectrofotómetro radica en que se utiliza en el laboratorio con el fin principal de diagnosticar, tomando en cuenta las propiedades de la luz y la interacción con otras sustancias. En general, este equipo está compuesto por 4 partes principales: una fuente, un monocromador, un divisor del haz, un área de muestra y un detector. También posee elementos ópticos como lentes o espejos, que transmiten la luz a lo largo de todo el equipo.

La espectroscopía es una técnica analítica que mide la cantidad de longitudes de onda discretas de luz UV o visible que son absorbidas o transmitidas a través de una muestra en comparación con una muestra de referencia o en blanco. Esta propiedad está influenciada por la composición de la muestra, potencialmente proporcionando información sobre lo que hay en la muestra y en qué concentración. 

¿Cómo funciona un espectrofotómetro?

Existen varios tipos de espectrofotómetros. Éstos se clasifican de acuerdo al tipo de muestra analizada; los hay de absorción atómica y de absorción molecular (espectrofotómetro UV-VIS). Un espectrofotómetro UV-VIS se basa en el proceso de absorción de la radiación ultravioleta-visible (radiación con longitud de onda comprendida entre los 200 y 780 nm) por una molécula. La absorción de esta radiación causa la promoción de un electrón a un estado excitado. Los electrones que se excitan al absorber radiación de esta frecuencia son los electrones de enlace de las moléculas, por lo que los picos de absorción se pueden correlacionar con los distintos tipos de enlace presentes en el compuesto. Debido a ello, la espectroscopía UV-VIS se utiliza para la identificación de los grupos funcionales presentes en una molécula. Las bandas que aparecen en un espectro UV-VIS son anchas debido a la superposición de transiciones vibracionales y electrónicas.

La luz tiene una cierta cantidad de energía que es inversamente proporcional a su longitud de onda. Por lo tanto, las longitudes de onda más cortas de la luz transportan más energía y las longitudes de onda más largas transportan menos energía

Aplicaciones de un espectrofotómetro

Los espectrofotómetros son empleados en muchos laboratorios en distintas áreas de la ciencia que van desde analizar un cultivo bacteriano, identificación de fármacos y las comprobaciones y cuantificación de la pureza del ácido nucleico, hasta el control de calidad en la industria de bebidas y la investigación química.

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